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琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
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产品: 浏览次数:850琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒 
品牌: 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
型号: 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
规格: 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
单价: 面议
最小起订量:
供货总量:
发货期限: 自买家付款之日起 3 天内发货
有效期至: 2022-03-15
最后更新: 2016-10-21 16:44
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详细信息

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注:可配合我公司的可见光凝胶切胶仪或者使用我公司专业研发生产的可见光凝胶成像系统检测效果,拍照。避免紫外对人体和样品带来的伤害,条带清晰,操作简便。详情可见www.abigen.com

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 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
DR0101   50次/DR0102   100次

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琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒
DR0101 50次
DR0102 100次
DR0103 200次
 产品介绍
在高离序盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。 产品特点:
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3. 溶胶液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
4. 改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
5. 快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀.
 操作步骤
提示:第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1. 在长波紫外灯下,用干净刀片将所需回收的DNA条带切下,尽量切除不含DNA的凝胶,得到凝胶体积越小越好。
2. 将切下的含有DNA条带凝胶放入1.5ml离心管,称重。
先称一个空1.5ml离心管重量,然后放入凝胶块后再称一次,两次重量相减,得到凝胶的重量。
3. 加3倍体积溶胶液DD。
如果凝胶重为100mg,其体积可视为100μl,则加入300μl溶胶液。
如果凝胶浓度大于2%,应加入6倍体积溶胶液。
4. 56℃水浴放置10分钟(或直至胶完全溶解)。每2-3分钟涡旋震荡一次帮助加速溶解。
5. 可选,一般不需要:每100mg最初的凝胶重量加入150μl的异丙醇,震荡混匀。
有时候加入异丙醇可以提高回收率,加入后不要离心。回收大于4Kb的片段时,不加入异丙醇,加入有时反而可能降低回收效率。
6. 将上一步所得溶液加入吸附柱EC中(吸附柱放入收集管中),室温放置1分钟,12,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。
如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱EC中。
7. 加入700μl漂洗液WB (请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
8. 加入500μl漂洗液WB,12,000rpm离心30秒,弃掉废液。
9. 将吸附柱EC放回空收集管中,12,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱EC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加50μl洗脱缓冲液EB(洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置2分钟,12,000rpm 离心1分钟。如果需要较多量DNA,可将得到的溶液重新加入吸附柱中,离心1分钟。
洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积不应少于25μl,体积过小降低DNA洗脱效率,减少产量。
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